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H7亚型禽流感抗体检测试剂盒 （鸡、鸭、鹅等禽类通用） 使用说明书
H7亚型禽流感抗体检测试剂盒
（鸡、鸭、鹅等禽类通用）
使用说明书
版号：H7 se180410
介绍
H7亚型禽流感抗体检测试剂盒检测家禽、野禽等动物血清中的H7亚型禽流感抗体，用于评估禽流感疫苗免疫状况及感染禽类的血清学辅助诊断。
本试剂盒采用竞争ELISA法，在酶标板条微孔上预包被H7抗原，运用单克隆抗体与血清中的抗体竞争固相载体中的结合位点，从而间接检测血清中的抗H7禽流感抗体。在试验中，加入待检血清及酶标记物（抗H7单克隆抗体标记），经过温育后，若样品中含有H7病毒特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，从而阻碍了酶标记物与抗原的结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，在微孔中加入TMB底物显色，样本的吸光度值与其所含有的抗体的含量成负相关，从而达到检测样品中抗体的目的。
组份
1 | 抗原预包被板条 | 1/2块 | 7 | 阴性对照 | 200µl |
2 | 酶结合物 | 6/12ml | 8 | 阳性对照 | 200µl |
3 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 9 | 封板膜 | 2/4张 |
4 | 显色液 | 11/21ml | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 终止液 | 15ml | |||
6
| 样本稀释液 | 100ml |
需自备的设备及试剂
1. 微量移液器： 0.5µl-10µl、10µl-100µl、100µl-1000µl。
2. 一次性移液器吸头。
3. 量筒：500ml。
4. 96孔板酶标仪。
5. 蒸馏水或去离子水。
6. 洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇动使结晶的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
注意事项
1. 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用前应摇匀，使用后放回2-8℃。
2. 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
3. 显色液和终止液对皮肤和眼可能有刺激性，使用时应该注意防护。
4. 显色液不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
5. 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，并尽快置于2-8℃)。
6. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
7. 严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
操作步骤
1. 取预包被的检测板（根据样品多少，可拆开分次使用），待检验板条每孔均需加入样本稀释液40ul，然后将待检血清10μl加入检测板，同时设阴性2孔和阳性对照1孔，取阴性及阳性对照各10μl分别加入反应孔中；
2. 在样本以及阴阳性对照混匀后，每孔加入50μl酶标记物。轻轻振匀孔中样品（勿溢出）。
3. 盖上封板膜，置37℃温育60分钟。
4. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗6次。每次用洗涤液注满板孔（约250μl），且每次需将洗涤液甩干。洗涤6次后在干净吸水纸上拍干。
5. 每孔显色液100ul，盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
6. 每孔加终止液50μl，使反应终止，10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度OD值。
试验成立的条件是：
阴性对照（N）OD均值>0.5；
阳性对照（P）OD值/阴性对照（N）OD均值 < 0.4。
计算方法：
样品OD值/阴性对照OD均值=S/N值。
阴阳性判断：
S/N值≥0.5则判断为阴性；
S/N值<0.5则判断为阳性。
有效期
贮存方法： 2 - 8ºC下贮存。
有效期： 12个月。
南京杜佰生物科技有限公司 出品
电话: 025-6611 8188/6601 8988
手机：178 9500 6881
网址: www.bioduby.com
邮箱: bioduby@163.com
H7亚型禽流感抗体检测试剂盒 （鸡、鸭、鹅等禽类通用） 使用说明书
H7亚型禽流感抗体检测试剂盒
（鸡、鸭、鹅等禽类通用）
使用说明书
版号：H7 se180410
介绍
H7亚型禽流感抗体检测试剂盒检测家禽、野禽等动物血清中的H7亚型禽流感抗体，用于评估禽流感疫苗免疫状况及感染禽类的血清学辅助诊断。
本试剂盒采用竞争ELISA法，在酶标板条微孔上预包被H7抗原，运用单克隆抗体与血清中的抗体竞争固相载体中的结合位点，从而间接检测血清中的抗H7禽流感抗体。在试验中，加入待检血清及酶标记物（抗H7单克隆抗体标记），经过温育后，若样品中含有H7病毒特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，从而阻碍了酶标记物与抗原的结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，在微孔中加入TMB底物显色，样本的吸光度值与其所含有的抗体的含量成负相关，从而达到检测样品中抗体的目的。
组份
1 | 抗原预包被板条 | 1/2块 | 7 | 阴性对照 | 200µl |
2 | 酶结合物 | 6/12ml | 8 | 阳性对照 | 200µl |
3 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 9 | 封板膜 | 2/4张 |
4 | 显色液 | 11/21ml | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 终止液 | 15ml | |||
6
| 样本稀释液 | 100ml |
需自备的设备及试剂
1. 微量移液器： 0.5µl-10µl、10µl-100µl、100µl-1000µl。
2. 一次性移液器吸头。
3. 量筒：500ml。
4. 96孔板酶标仪。
5. 蒸馏水或去离子水。
6. 洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇动使结晶的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
注意事项
1. 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用前应摇匀，使用后放回2-8℃。
2. 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
3. 显色液和终止液对皮肤和眼可能有刺激性，使用时应该注意防护。
4. 显色液不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
5. 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，并尽快置于2-8℃)。
6. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
7. 严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
操作步骤
1. 取预包被的检测板（根据样品多少，可拆开分次使用），待检验板条每孔均需加入样本稀释液40ul，然后将待检血清10μl加入检测板，同时设阴性2孔和阳性对照1孔，取阴性及阳性对照各10μl分别加入反应孔中；
2. 在样本以及阴阳性对照混匀后，每孔加入50μl酶标记物。轻轻振匀孔中样品（勿溢出）。
3. 盖上封板膜，置37℃温育60分钟。
4. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗6次。每次用洗涤液注满板孔（约250μl），且每次需将洗涤液甩干。洗涤6次后在干净吸水纸上拍干。
5. 每孔显色液100ul，盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
6. 每孔加终止液50μl，使反应终止，10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度OD值。
试验成立的条件是：
阴性对照（N）OD均值>0.5；
阳性对照（P）OD值/阴性对照（N）OD均值 < 0.4。
计算方法：
样品OD值/阴性对照OD均值=S/N值。
阴阳性判断：
S/N值≥0.5则判断为阴性；
S/N值<0.5则判断为阳性。
有效期
贮存方法： 2 - 8ºC下贮存。
有效期： 12个月。
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