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犬细粒棘球绦虫抗原检测试剂盒
使用说明书
版号:Hyd-Ag se190107
介绍
细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)抗原检测试剂盒用于检测犬粪便中的细粒棘球绦虫抗原,用于犬及食肉动物细粒棘球绦虫感染的辅助诊断。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,在酶标板条微孔上预包被细粒棘球绦虫抗体。在试验中,加入待检样本,经过温育后,若样品中含有细粒棘球绦虫抗原,则与包被板上的抗体结合,温育后经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后,再加入酶标抗体,与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合,再经洗涤除去未结合的酶结合物,在微孔中加入TMB显色液,经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗原含量成正比,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
组份
1 | 抗原预包被板条 | 1块 | 6 | 终止液 | 11ml |
2 | 酶结合物 | 11ml | 7 | 阴性对照 | 1.0ml |
3 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 8 | 阳性对照 | 1.0ml |
4 | 显色液 | 11ml | 9 | 封板膜 | 2张 |
5 | 5X样本处理液 | 50ml | 10 | 说明书 | 1份 |
需自备的设备及试剂
微量移液器: 0.5µl-10µl、10µl-100µl、100µl-1000µl。
一次性移液器吸头。
量筒:500ml。
96孔板酶标仪。
蒸馏水或去离子水。
洗瓶或洗板机。
洗涤液与样本稀释液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
5X样本处理液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作5倍稀释。稀释好的样本处理液可在4℃存放一周左右。
样品的处理
称取1.0 g 待检犬粪于离心管中,加入2.0ml样本稀释液混匀。2000g离心10分钟取上清待检。
注意:阴性和阳性对照不用稀释。
注意事项
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。
不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
显色液和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
TMB(显色液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。
所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
操作步骤
取预包被的检测板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检样本取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性对照和阳性对照各2孔,取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复6次,最后在干净吸水纸上拍干。
每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤6次, 方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
每孔加显色液100µl,轻微震荡混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。
试验成立的条件是:
阴性对照(N)OD均值<0.20,同时阳性对照(P)OD均值〉0.5。
计算方法:
S/P值=样本OD值/阳性对照OD均值
阴阳性判断:
S/P值 <0.45判为阴性;
S/P值≥0.45则判断为阳性。
有效期
贮存方法: 2 - 8ºC下贮存。
有效期: 12个月。
南京杜佰生物科技有限公司 出品
电话: 025-6611 8188/6601 8988
手机:178 9500 6881
网址: www.bioduby.com
邮箱: bioduby@163.com
犬细粒棘球绦虫抗原检测试剂盒
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细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)抗原检测试剂盒用于检测犬粪便中的细粒棘球绦虫抗原,用于犬及食肉动物细粒棘球绦虫感染的辅助诊断。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,在酶标板条微孔上预包被细粒棘球绦虫抗体。在试验中,加入待检样本,经过温育后,若样品中含有细粒棘球绦虫抗原,则与包被板上的抗体结合,温育后经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后,再加入酶标抗体,与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合,再经洗涤除去未结合的酶结合物,在微孔中加入TMB显色液,经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗原含量成正比,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
组份
1 | 抗原预包被板条 | 1块 | 6 | 终止液 | 11ml |
2 | 酶结合物 | 11ml | 7 | 阴性对照 | 1.0ml |
3 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 8 | 阳性对照 | 1.0ml |
4 | 显色液 | 11ml | 9 | 封板膜 | 2张 |
5 | 5X样本处理液 | 50ml | 10 | 说明书 | 1份 |
需自备的设备及试剂
微量移液器: 0.5µl-10µl、10µl-100µl、100µl-1000µl。
一次性移液器吸头。
量筒:500ml。
96孔板酶标仪。
蒸馏水或去离子水。
洗瓶或洗板机。
洗涤液与样本稀释液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
5X样本处理液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作5倍稀释。稀释好的样本处理液可在4℃存放一周左右。
样品的处理
称取1.0 g 待检犬粪于离心管中,加入2.0ml样本稀释液混匀。2000g离心10分钟取上清待检。
注意:阴性和阳性对照不用稀释。
注意事项
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。
不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
显色液和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
TMB(显色液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。
所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
操作步骤
取预包被的检测板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检样本取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性对照和阳性对照各2孔,取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复6次,最后在干净吸水纸上拍干。
每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤6次, 方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
每孔加显色液100µl,轻微震荡混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。
试验成立的条件是:
阴性对照(N)OD均值<0.20,同时阳性对照(P)OD均值〉0.5。
计算方法:
S/P值=样本OD值/阳性对照OD均值
阴阳性判断:
S/P值 <0.45判为阴性;
S/P值≥0.45则判断为阳性。
有效期
贮存方法: 2 - 8ºC下贮存。
有效期: 12个月。
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